当前免疫组化技术围绕着提高敏感性与特异性不断改进发展，但它仍有其局限性，应用于蛋白水平，敏感性与特异性不足，故应与其它组织化学、电镜及分子生物学技术相结合。 做免疫组化的注意事项具体如下： 1、防止假阳性与假阴性，防止操作中的污染； 2、规范操作时阳性与阴性对照选用2种以上同类抗体。目前肿瘤均为相关抗原，特异性不足，多种同类抗原可提高阳性率； 3、正确评价免疫组化的结果，其结果受抗体、特异性与质量、操作、标本固定等多种因素影响； 4、合理选择抗体，既要符合设计要求，又要价廉物美； 5、待检标本抗原保存要好，要求快速、新鲜、充分地固定，福尔马林液固定标本要做抗原修复。

免疫组化又叫免疫组织化学，是应用免疫学基本原理，抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理。这个特异性原理好比每一把锁配一把钥匙，每个钥匙只能开一把锁，即每一种抗体只能和相应的抗原结合，再通过化学反应，使标记抗体的显色剂显色，来确定组织细胞内的抗原，对其进行定性与定位的研究，称为免疫组织化学技术。 肿瘤来源于人体正常组织，不同组织来源的肿瘤治疗方案是不一样的，因此在诊断时必须要区分组织来源。但是肿瘤在发生发展中，分化程度有所不同，有时难以判断其组织来源，而每个人体组织都含有一定数量的抗原，不同组织的抗原并不完全相同。免疫组化病理诊断就是应用免疫组化的方法，通过不同的抗体组合，检测出肿瘤组织含有的相应抗原或不含有哪些抗原，从而判断其组织来源，可协助临床确定治疗方案。

病理诊断是最终诊断，大多数疾病的确诊都需要做病理检查，病理检查也是金标准。结核是由人型结核分枝杆菌感染所致，大部分为肺结核，小部分会在肺外发病，统称为肺外结核，如淋巴结核、骨结核、肾结核等。结核病从本质来讲就是一个炎症，不过它是一种特殊炎症，在病理上有特征性改变，镜下可见上皮样细胞形成的结节，多核巨细胞及干酪样坏死，结节的外周有纤维组织围绕及大量的淋巴细胞浸润。 病理医生根据这种特征性的改变来诊断结核。但病理检查是一种有创检查，需要从患者身上取少量组织，这会造成患者一定的痛苦，因此患者的接受度不高。目前肺结核的诊断主要依靠胸部影像学、痰结核菌检查，并结合临床表现，PPT试验等来综合考虑。只有诊断不明确以及难以与肿瘤，如结核瘤等疾病鉴别的情况下才需要做病理检查，另外肺外结核通常需要做病理检查才能确诊。

近年来随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体出现，使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中，5%-10%的病例单靠常规染色镜检难以做出明确诊断。尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。免疫组织化的临床适应症主要包括以下几方面： 1、恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断； 2、确定转移性恶性肿瘤的原发部位； 3、对某类肿瘤进行进一步的病理分型； 4、软组织肿瘤的治疗通常需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究，对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的； 5、发现微小的转移灶，有助于临床治疗方案的确定，包括手术范围的确定； 6、为临床提供治疗方案的选择。

冷冻切片可以让外科医生在手术过程中马上了解病变性质，以便及时确定手术范围，并且做出相应处理。冰冻切片组织在离体后必须尽快送检，不可固定，保持新鲜，也不可以沾水，以免在冰冻时形成冰晶，影响观察。常规切片及染色最少需要3天时间，而快速冰冻切片的时间制片加诊断只有30分钟，要在如此之短的时间内做出诊断，难度还是相当高，取材也有局限性，因此制作切片的质量也不如常规石蜡切片高。 因而冰冻切片的确诊率比常规切片要低，达到90%即为优秀。冰冻切片有一定的延迟诊断率和误诊率，不能作为最终诊断的依据，只可作为外科医生手术中的参考，所以冰冻切片尚不能广泛应用，应在术前力求通过常规病理检查明确诊断。部分患者常规病理检查结果不满意，或病灶的位置特殊，如靠近大血管等，无法做常规病理检查的，可以选择性应用术中快速冰冻，但是事后仍需用常规石蜡切片对照和存档。

大细胞癌是肺癌的一种分型，又称为大细胞未分化癌，约占肺癌总数的15%-20%。部分大细胞癌发生于大支气管，肿块常较大。肿瘤通常侵犯脏层胸膜、胸壁或邻近结构。切面显示软的、粉褐色肿瘤，通常伴有坏死，少数伴有空洞。 镜下癌细胞常呈实性团块状或片状或弥漫分布，癌细胞体积较大，细胞质很丰富，通常匀质淡染，也可呈颗粒状或胞质透明。细胞核圆形、卵圆形或不规则形，染色深，异型性明显，核分裂象较多见。 大细胞癌的癌组织无任何鳞癌、腺癌或神经内分泌癌分化的组织形态学特点以及免疫表型。大细胞癌的播散形式与其它非小细胞癌相同，最常见的转移部位是肺门或纵隔淋巴结，而后转移至胸膜、肝、骨、脑等部位。大细胞癌的恶性程度较高，生长迅速，转移早而广泛，生存期多在一年以内。

肺结核病分为原发性肺结核病和继发性肺结核病。原发性的肺结核病是第一次感染结核杆菌所引起的肺结核病，多发生于儿童。继发性肺结核病是指再次感染结核杆菌引起的肺结核病，多见于成人。继发性肺结核病可分为以下几种类型： 1、局灶型肺结核：继发性肺结核的早期病变，镜下病变以增生为主，中央为干酪样坏死。患者常无自觉症状，多在体检时发现； 2、浸润型肺结核：临床上最常见的活动性、继发性肺结核，多由局灶型肺结核发展而来； 3、慢性纤维空洞型肺结核：浸润型肺结核病情进展可在局部形成急性空洞，若经久不愈，则可发展为慢性纤维空洞型肺结核； 4、干酪性肺炎：可由浸润型肺结核恶化进展而来，镜下见大片干酪样的坏死灶，此型结核病情危重； 5、结核球：直径2-5cm，有纤维包裹的孤立的境界分明的干酪样坏死灶，有时很难与周围型肺癌鉴别，治疗多采取手术切除； 6、结核性胸膜炎：根据病变性质可分为干性和湿性两种，以湿性结核性胸膜炎为常见。多见于年轻人，一般经适当治疗可吸收。从肺结核病的分类可知，有些肺结核没有胸水，有些可有胸水，这是不同类型的肺结核导致的，经治疗胸水是可以吸收、痊愈的，这与癌性胸水是两个概念。

冷冻切片可以查的内容具体如下： 1、在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断、原定手术方案不相符合或怀疑时，需要病理确定； 2、了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞或转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或其它的治疗措施； 3、对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤组织； 4、在做剖腹探查时，所发现的肿块或异样的组织，确定病变是否为肿瘤并判断肿瘤的良恶性； 5、帮助识别手术中某些意外和确定可疑微小组织，如甲状旁腺、输卵管或输精管等； 6、取新鲜组织供激素受体测定、肿瘤药敏试验、电镜检查和分子生物学检查等特殊的需要。

神经内分泌肿瘤是一个独特的肿瘤亚群，具有共同的形态、超微结构、免疫组化和分子学上的特征。形态学上可以识别神经内分泌肿瘤的主要类型是小细胞癌、大细胞神经内分泌癌、典型类癌和不典型类癌。 类癌亦称典型类癌，来源于支气管黏膜上皮及黏膜下腺体中的神经内分泌细胞，即K细胞，在胎儿肺中存在着大量神经内分泌细胞，这些细胞在肺的发育过程中起着重要的作用。类癌可看作分化好的低度恶性神经内分泌癌，患者就诊时大多无症状。肺部症状因肿瘤发生部位而异，最常见的症状是咳嗽和咯血。患者无性别差异，也是儿童及青春期常见的肿瘤。大体分以下3型： 1、中央型：最常见，占60%-80%，多见于成人，肿瘤多在支气管内生长； 2、周围型：肿瘤位于外周部肺膜下肺实质内，多呈多个结节，有的可在肺内弥漫型浸润而呈多灶性结节； 3、微瘤型：极少见，是小细支气管内神经内分泌细胞局灶增生所致。肿瘤常为多发。免疫组化染色显示，大多数类癌细胞角蛋白阳性，对神经内分泌标记如神经元特异性烯醇化酶、嗜铬蛋白A、突触素及人自然杀伤细胞相关抗原等呈阳性反应。

中央型肺癌发生于主支气管或叶支气管，在肺门部形成肿块，此型最常见，约占肺癌总数的60%-70%。早期病变气管壁可弥漫增厚或形成息肉状或乳头状的肿物突向管腔，使气管狭窄或闭塞。随着病情进展，肿瘤破坏气管壁向周围肺组织浸润、扩展，在肺门部形成包绕支气管的巨大肿块。同时癌细胞常转移至支气管旁和肺门淋巴结，肿大的淋巴结常与肺门肿块融合。 周围型肺癌起源于肺段或其远端支气管，在靠近肺膜的肺周边部形成孤立的结节状或球形结构，直径通常在2-8cm，与支气管的关系不明显。该型约占肺癌总数的30%-40%，发生淋巴结转移常较中央型晚，但可侵犯胸膜。