普鲁卡因青霉素作用的维持时间通常可以在24小时以上。建议遵医嘱使用此药，以免用药方式或用药剂量错误而出现过敏反应或肾脏损伤等。
普鲁卡因青霉素属于长效青霉素，其在水中的溶解度相对较小，在进行肌肉注射后，被人体吸收和排泄得比较缓慢，能够治疗对青霉素高度敏感病原体导致的轻、中度感染，如A组链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌等，常见疾病为扁桃体炎、肺炎、疖肿等。
普鲁卡因青霉素药效通常可以持续24小时及以上，通常每日注射1次即可，但如果患者病情较严重，如扁桃体肿大明显、高热或疖肿流脓等，则需要在医生指导下注射2次，加强治疗效果。病情好转后需要减少用药次数或剂量，以免加重肾脏负担，导致肝肾损伤。
此外，在使用此药物之前需要进行皮试，以防出现药物过敏，引起荨麻疹，导致皮肤瘙痒、红肿等，严重者可能会引起过敏性休克，需要急诊抢救，但这种情况较少发生，患者不必过于担心。如果出现过敏反应，可外用炉甘石洗剂、糠酸莫米松乳膏，或口服盐酸西替利嗪片、氯雷他定糖浆等进行治疗。