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荧光原位杂交技术

认识检查

检查概述

荧光原位杂交(FISH)技术是一种非放射性的分子标记技术,它借助于荧光显微镜,可对待测定的遗传物质——DNA进行定性、定量或相对定位分析,具有安全、快速、灵敏度高、特异性好、定位准确、探针能长期保存、可进行多重染色等特点。目前,这项技术广泛应用于细胞遗传学、肿瘤学的研究以及临床基因诊断和治疗监测。

检查目的

荧光原位杂交技术可应用于基因组研究、肿瘤遗传学研究、病毒感染分析,以及产前针对性地染色体筛查等,尤其是产前筛查,荧光原位杂交技术可对胎儿常见的13、18、21、X、Y等染色体非整倍性异常进行快速产前诊断。此外,还可以对产前(或出生后)核型分析或其他分子细胞遗传学检测(如染色体微阵列分析)所提示的异常进行验证。

检查风险

荧光原位杂交技术的样本范围较广,外周血、羊水、绒毛、骨髓细胞以及胸水、腹水等体液都可以,所以检查风险因具体的样本收集方式不同而有所不同。若采集的样本是外周血,可能会因为按压不当或者伤口受到污染,导致伤后出血、感染;若通过羊水穿刺采集标本,可能会造成孕妇出血、出血性休克、羊水外流、流产等风险,但一般风险较小,谨慎操作多可避免。

检查科室

荧光原位杂交技术临床运用范围较广,涉及科室较多,常见的有产科、遗传科、肿瘤科、检验科等。

检查费用

荧光原位杂交技术检测的费用一般在2700~4000元,检测的项目不同,所在的医院以及检测设备不同,价格存在一定的差异。

检查前

检查准备

1.如果是采集外周血,被检者穿着舒适即可,没有过多要求,若是需要穿刺采集羊水、胸水或骨髓等,建议被检者尽量穿着方便穿脱,且舒适宽松的上衣。
2.荧光原位杂交检测对被检者的饮食没有明确的限制,检测前注意饮食清淡,避免重油重辣。
3.检查前避免过度劳累,尤其是孕妇,要保证充足的休息。

是否空腹

检查适应症

1.高度怀疑患有癌症或癌前病变者,如乳腺癌、膀胱癌、淋巴瘤、白血病等。

2.可能存在EB病毒感染,且有检查需求者。

3.无创产前DNA检测(NIPT)发现异常的孕妇;年龄≥35岁的高龄孕妇;夫妇一方为染色体病患者,或曾妊娠、生育过染色体病患儿或有家族遗传病史的孕妇。

检查禁忌

正处于化疗、放疗、刚进行手术治疗,以及身体严重不适的人群暂时不适宜做,可待病情稳定后再检测。

检查中

检查过程

以羊水穿刺过程为例,被检者需要配合医生进行以下操作:

1.孕妇取平卧位,应用超声核实胎儿的数目及其羊膜囊分隔情况,并对胎儿的胎位、羊水指数以及胎盘位于宫腔的位置等进行测量,对胎儿进行定位。在超声引导下定位穿刺点,应选取羊水量相对较多处,且尽量避开胎盘部位。

2.选好进针点后,穿刺医生会为孕妇消毒皮肤,在超声引导下,用带针芯的专用穿刺针在选好的点位快速进针,直达羊膜腔。这个过程中,孕妇尽量保持放松状态,不要太紧张,也不要随意晃动身体。

3.确定穿刺针已在羊膜腔内,医生以负压将羊水抽出,一般抽取羊水20毫升,分别装在2支消毒试管内,加盖,立即送实验室进行细胞培养。

4.拔出穿刺针,用无菌纱布覆盖针眼,孕妇或家属帮忙按压穿刺点2分钟即可。

不适反应

羊水穿刺为有创检查,进针时孕妇可能会有一定不适感,而且部分孕妇可能会因为焦虑、担心等情绪,影响到其感知,放大不适感受,导致穿刺过程较难忍受。

注意事项

1.孕妇在进行羊水穿刺时,尽量保持放松状态,如果孕妇很紧张,可能会影响胎儿状态,不利于穿刺。
2.穿刺过程很快,但如果孕妇有不适症状,且难以忍受时,要及时与医生、护士沟通,切忌乱动。

检查后

报告产出时间

荧光原位杂交检测无需细胞培养,不受培养条件和实验室环境的影响,分析周期短,一般最快可以在1~2天内获得检测结果。但为了保证结果准确可靠,两次检测结果误差大于10%时,则需另一位专业技术人员再进行计数,必要时需重做一次,所以报告发放时间可能会有所延迟,大概在3~5个工作日。

注意事项

1.穿刺后孕妇需注意休息,尤其是刚穿刺完,至少要静卧休息两小时以上,避免剧烈运动以及搬运重物等。
2.穿刺后,要注意腹部穿刺口清洁消毒,同时孕妇需禁性生活半个月以上。

检查报告解读

检查所见

医生通过对指定染色体的荧光信号进行计数判读,进行风险评估,以常见的用于产前诊断和筛查的荧光原位杂交检测为例,介绍具体检查结果分析情况。

常见诊断

阴性、阳性。

表示正常的结果

阴性。

表示异常的结果

染色体荧光信号数量异常
异常结果的可能疾病: 唐氏综合征 、13-三体综合征 、18-三体综合征
异常结果分析:

以21号、13号、18号染色体的相应部位序列作探针,与外周血中的淋巴细胞或羊水细胞进行杂交。红色信号表示21号染色体,绿色信号表示13号染色体,青色信号表示18号染色体。染色体数目正常的细胞显示2个红色荧光点、2个绿色荧光点及2个青色荧光点,若出现3个红色荧光点、3个绿色荧光点或3个青色荧光点,即提示染色体数目异常,分别见于唐氏综合征、13-三体综合征、18-三体综合征。

诊疗建议:

唐氏综合征、13-三体综合征和18-三体综合征都是致残与致死率较高的疾病,都可表现出智能低下、发育迟缓、特殊面容,以及手足畸形、内脏及生殖器畸形等多种症状。若在产前明确诊断,建议及时终止妊娠;若患儿已经出生,建议积极治疗相关病症,并耐心进行教育与训练,使其掌握基础生活技能。

染色体荧光信号位置异常
异常结果的可能疾病: 白血病
异常结果分析:

染色体出现异常的易位情况,即荧光原位杂交检测结果阳性,可能存在造血干细胞恶性克隆的现象,提示有血液疾病急性发作的风险,临床常见于白血病。

诊疗建议:

白血病是血液系统恶性肿瘤,具有增殖和生存优势的白血病细胞在骨髓内无限制增生和积聚,逐渐取代了正常造血,使红细胞、白细胞等无法正常产生和发挥作用,从而引起一系列症状,也可引起多器官功能衰竭,甚至死亡。一旦确诊,需要积极进行化疗、支持以及强化治疗。

相关检查指标

参考资料
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