骨髓细胞形态学检查是通过观察骨髓涂片中细胞的形态以及细胞间的比例关系来检查骨髓细胞量和质的变化,从而诊断与造血系统有关的疾病,属于造血系统疾病最常用的基本方法。临床上凡遇恶病质、体重锐减、出血倾向、血细胞明显增多、不明原因的肝脾淋巴结肿大,以及怀疑有原虫病等,均可通过该检查明确。
骨髓细胞形态学检查临床应用广泛,主要用于诊断血液系统疾病和感染性疾病,具体如下:
1.诊断血细胞变化和形态异常相关疾病
(1)血细胞减少(尤其是不易临床解释)的各种贫血、白细胞减少症和血小板减少症;
(2)疑似的脾功能亢进(简称脾亢)、浆细胞骨髓瘤(PCM)、类脂质代谢障碍性疾病等;(3)血细胞增加的白血病、类白血病反应、感染,以及骨髓增殖性肿瘤(MPN)和淋巴瘤等,包括这些疾病的可疑病例;
(4)血细胞形态明显异常者。
2.经一定检查原因未明或不明的相关体征
(1)脾和(或)肝大;
(2)淋巴结肿大;
(3)发热;
(4)骨痛或骨质破坏;
(5)血沉明显增高,尤其是>35岁者;
(6)胸腔积液;
(7)高钙血症和皮肤病损;
(8)年龄较大者的蛋白尿及肾脏受损;
(9)紫癜、出血或黄疸等。
3.需作血液病病期诊断和治疗观察
前者诸如对淋巴瘤病期的评估;后者如造血和淋巴组织肿瘤化疗前后的骨髓评估。
4.评估体内铁的储存
骨髓细胞内外铁检查仍是目前评价体内铁含量多少的金标准,加之直观的细胞形态学所见,其他方法难以比拟。
5.诊断某些感染性疾病
骨髓中含有丰富的营养成分和大量单核-巨噬系统的细胞,当一些病原体感染时,尤其是一些血液寄生虫感染时,骨髓涂片中易于查找疟原虫、利什曼原虫、弓形虫等,对明确诊断具有重要意义。
6.诊断恶性肿瘤骨髓转移
骨髓是许多恶性肿瘤侵袭的好发部位,如肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤等发生骨髓转移时,可在骨髓涂片中见到相应的肿瘤细胞,但转移的肿瘤细胞形态变异较大,一般不易确定其类型和追溯其原发灶。有时,某些肿瘤的发现可能最早在骨髓中查到转移癌细胞,有助于进一步明确诊断。
7.诊断某些类脂质沉积病
如戈谢病、尼曼-皮克病、海蓝组织细胞增生症等脂类代谢异常性疾病,骨髓涂片中可见到巨噬细胞中蓄积的类脂质而形成的特殊形态的戈谢细胞、尼曼-皮克细胞和海蓝组织细胞等,对明确诊断具有重要意义。
骨髓细胞形态学检查一般在专门的骨髓检查科室完成,需要患者配合完成骨髓采集,而且通常与骨髓活检一起进行。
1.选择取材部位:对穿刺点周围进行消毒并局部麻醉,根据穿刺点取合适体位。成人患者首取髂后上棘,患者取侧卧位,其次是髂前上棘,患者取仰卧位。也可在胸骨采集骨髓,常被用于髂骨穿刺获取的标本不能解决诊断,以及需要更多地了解造血功能时,患者取仰卧位。3岁以下患儿常选取胫骨。
2.抽吸骨髓:术者将骨髓穿刺针固定器固定在一定长度(胸骨穿刺约1.0cm、骼骨穿刺约1.5cm),左手的拇指和示指固定穿刺部位,右手持针向骨面垂直刺入(若为胸骨穿刺,则应保持针体与骨面成30°~40°),当针尖接触骨质后,将穿刺针绕针体长轴左右旋转,缓缓钻刺骨质,当感到阻力消失,穿刺针进入骨髓腔后,拔出针芯,接上干燥的10ml或20ml注射器,用适当力量抽吸0.1~0.2ml骨髓滴于载玻片上。
3.按压包扎:抽吸完毕,重新插入针芯,用无菌纱布置于针孔处,拔出穿刺针,按压1~2min后用胶布固定纱布。
4.推制涂片:将抽吸的骨髓液置于载玻片上立即制片,一般涂片6~8张;对疑似急性白血病者涂片8~10张。因部分需要细胞化学和免疫化学染色的血液病不能预见,所以涂片张数宜多。
骨髓细胞形态学检查一是观察细胞的形态变化是否正常,如高尔基体发育、颗粒多少、细胞毒性变化、细胞大小变化和病态造血性异常等;二是了解是否出现了正常情况下不应有的异常细胞,如转移性肿瘤细胞。因此,检查结果报告单主要包括患者的基本信息,检验骨髓小粒和油滴、巨核细胞计数与分类、有核细胞分类、粒红比值、细胞化学染色结果,细胞形态学特征描述和诊断意见等。
正常结果为各细胞形态正常、比例正常,以及无异常细胞出现,具体如下:
1.骨髓有核细胞增生程度多为增生活跃。
2.粒系细胞约占总有核细胞的40%~60%,其中原粒细胞<2%,早幼粒细胞<5%,中性中幼粒细胞和晚幼粒细胞各<15%,中性杆状核粒细胞的百分率>中性分叶核粒细胞,嗜酸性粒细胞<5%,嗜碱性粒细胞<1%。各种细胞形态及染色基本正常。
3.红系细胞中幼红细胞约占总有核细胞的20%左右,其中原红细胞<1%,早幼红细胞<5%,中幼红细胞和晚幼红细胞各约占10%,细胞形态及染色基本正常。成熟红细胞大小、形态、染色基本正常。
4.M∶E值为(2~4)∶1,平均为3∶1。
5.淋巴细胞约占总有核细胞的20%,小儿可达40%,均为成熟淋巴细胞,原始与幼稚淋巴细胞难见。
6.单核细胞<4%,原始与幼稚单核细胞难见。浆细胞<2%,原始与幼稚浆细胞难见。
7.1.5×3cm²骨髓片膜上可见巨核细胞7~35个,多为成熟型巨核细胞,原始与幼稚巨核细胞难见。
8.可见少量巨噬细胞、组织嗜碱细胞、浆细胞和内皮细胞等。
9.核分裂细胞约占0.1%。
骨髓细胞种类包括粒系细胞,如原粒细胞、早幼粒细胞、中性中幼粒细胞、中性晚幼粒细胞、中性杆状核粒细胞和中性分叶核粒细胞等,红系细胞如原红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞和晚幼红细胞,淋巴系细胞如原淋巴细胞、幼淋巴细胞和淋巴细胞,巨核系细胞如原巨核细胞、幼巨核细胞、颗粒型巨核细胞、产血小板型巨核细胞,以及少量骨髓基质细胞如成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等。各种细胞形态学变化提示的病因并不相同,以下简要介绍几种异常结果:
1.红系细胞异常
(1)巨幼红细胞:为叶酸或维生素B12缺乏所致的具有特征的异型幼红细胞。胞体明显增大,胞核增大为主,染色质疏松,显示核幼质老的不同步现象。原早幼红细胞,染色质明显细疏似烟头丝样,副染色质明显,胞质嗜碱性常增强,尤其是原始红细胞;中、晚幼红细胞染色质虽为块状,但非常松散。
(2)类巨变幼红细胞:主要见于髓系肿瘤。多见于晚幼红和中幼红细胞,胞体增大常明显于胞核,核染色质松散不明显或致密状,胞质血红蛋白着色显明。
(3)侏儒幼红细胞和炭核幼红细胞:侏儒幼红细胞为胞体偏小、胞质发育不良、血红蛋白合成不足,胞核相对固缩显老,主要见于IDA和珠蛋白生成障碍性贫血。
2.粒系细胞异常
(1)中性颗粒缺乏粒细胞:见于不同阶段粒细胞,为胞质内颗粒稀少或缺如,胞质染色固有的杏黄(红)色减退,胞质有清淡感。见于MDS、MDS-MPN、AML等疾病。
(2)双核幼粒细胞:见于不同阶段,特点为双核,多为大小、形状对称,呈"八"字形或镜形;一部分为胞核大小不一和异型。主要见于反应性粒细胞增多症、粒细胞相对增多的MDS和AML,对称性双核者多见于良性血液病。
(3)多核幼粒细胞:为胞核出现三个或更多者,早、中幼粒细胞中比晚幼粒细胞多见。通常细胞较大,胞核可呈异型性,非特异性颗粒常多,可有变性空泡;此异常幼粒细胞对诊断某些感染,尤其是特殊感染或重症感染有帮助;白血病和MDS也可见多核幼粒细胞,但胞质非特异性颗粒常偏少。
3.巨核系细胞异常
(1)空泡变性巨核细胞:为巨核细胞质边缘出现空泡,见于ITP、MDS和感染等。
(2)白血病性原始巨核细胞:胞体大小悬殊,常为多形态与大小不一并存;胞核规则圆形,多偏位,染色质紫红色粗颗粒状;胞质常较丰富、嗜碱性无颗粒,呈空泡状、花瓣状、棉球样、龟甲状、分离状,并有云雾状、层状态和脱落状。
4.单核细胞和巨噬细胞异常
(1)白血病性原幼单核细胞:显著大小不一,多有明显的胞体和核的异型性,胞质中可见尘样颗粒和吞噬的细胞。出现和白血病有关。
(2)刺激性异型和转化中单核细胞:常见胞质增多、嗜碱性明显增强和突起者为细胞受刺激的活跃形态胞体增大、胞质空泡,可含有吞噬物者。这些细胞多见于感染,也可见于应激反应显著时。
(3)印戒状巨噬细胞:为胞核呈类圆形、豆形或肾形,明显偏位,染色质较单核细胞疏松;胞质丰富,呈裙边样或泡状吹起,常有许多空泡环胞膜存在,靠近胞核的中央部分胞质常显厚实的内容物,如含有细小紫红色颗粒和吞噬的少量血小板及红细胞。常见于伤寒等感染性疾病。
5.淋系细胞异常
(1)原、幼淋巴瘤细胞:侵犯骨髓和血液的淋巴瘤细胞形态变异很大,除部分同ALL形态外,为胞体大小明显不一,胞核异型(如核长芽和凸起),胞质较丰富,周边胞质嗜碱性强,一般无颗粒。该细胞的出现提示淋巴细胞瘤。
(2)肿瘤性成熟T细胞:成熟型T淋巴瘤/白血病细胞,共性特点常是高核质比例、不规则核形、轻至中度嗜碱性胞质和无颗粒,临床上多见于中老年,常有明显浸润性:肝脾和淋巴结肿大、骨损害等。
(3)肿瘤性成熟B细胞:多与T细胞相反,胞体核质比例低,胞体较大或小,核形规则而多偏位,胞质较丰富、常偏位和凸起。除提示B细胞肿瘤外,患者多有孤立性脾大。
确诊具体疾病后采取针对性治疗,一般需要设计个性化的治疗方案,比如对于白血病,需要给予成分输血、靶向治疗、放化疗以及骨髓移植等疗法。