临床进行淋巴结穿刺时，首先要确定穿刺部位，通常选择表浅且适于穿刺有明显增大的淋巴结；确定部位后进行常规消毒，局部皮肤铺无菌巾，术者戴无菌手套；选择合适的方位在超声指导定位下进行穿刺，利用负压抽出淋巴结内的液体和细胞成分；穿刺后及时制备涂片，另外穿刺完毕后，要对局部压迫止血，无出血后再用纱布等进行包扎固定。

进行穿刺的时间最好定于餐前，以免抽取液中脂质过多，影响检查结果。如果穿刺时未能取得抽出液，在不出血的前提下，可由原刺入点刺入，在不同方向进行穿刺、取样。同时为患者安全考虑，尽量选择远离大血管的淋巴结。