铺巾的操作方法被称为手术区铺单法，通常是在手术区皮肤消毒后进行，其原则是除手术区外，手术区周围要有4-6层无菌布单覆盖，外周最少2层。以腹部手术为例，一般以铺无菌巾、铺手术中单、铺手术洞单的顺序进行，其中铺无菌巾包括折边与传递、铺巾、铺巾完成。
一、铺无菌巾
又称切口巾，即用4块无菌巾遮盖切口周围。
1、折边与传递：器械护士持无菌巾折边的1/3，第1、2、3块无菌巾的折边朝向第一助手，第4块的折边朝向器械护士自己，按顺序传递给第一助手；
2、铺巾：第一助手接过折边的无菌巾，分别铺于切口下方、上方及对侧，最后铺自身侧。每块巾的内侧缘距切口线≤3cm。已铺好的无菌巾不可随意移动，如需移动只能向切口外移；
3、铺巾完成：手术巾的4个交角处分别用布巾钳夹住。铺巾完成后，第一助手应再次消毒手臂并穿无菌手术衣，戴无菌手套后再铺其他层的无菌单。
二、铺手术中单
将2块无菌中单分别铺于切口的上、下方。铺巾者需注意避免自己的手触及未消毒物品。
三、铺手术洞单
将有孔洞的剖腹大单正对切口，短端向头部、长端向下肢，先向上方再向下方，分别展开。展开时手卷在剖腹单里面，以免污染。要求短端盖住麻醉架，长端盖住器械托盘，两侧和足端应垂下＞手术台边缘30cm。已铺下的无菌单只能由手术区向外移动，不可向内移动。
手术区铺单法的目的是建立无菌安全区，显露手术切口所必需的最小皮肤区域，其余部位予以遮盖，以避免和减少术中污染。