400万单位的青霉素，配皮试液首先400万单位青霉素加20mL生理盐水，相当于1mL液体中含有20万单位的青霉素。从20mL液体中抽出0.1mL加入0.9mL的生理盐水，相当于1mL液体中含有两万单位的青霉素。
从上边的1mL液体中抽出0.1mL，加入0.9mL的生理盐水，相当于1mL液体中含有两千单位的青霉素，然后从里边抽出0.25mL加入0.75mL的生理盐水，也就是相当于1mL的液体中含有500U的青霉素，这时皮试液就算配置完成了。
做青霉素皮试的时候用75%酒精消毒，屈侧腕关节上方3cm处的皮肤。如果酒精过敏则用生理盐水代替，抽取皮试液0.1mL，在皮内注射成一个皮丘，20分钟后看结果。如果注射局部出现红肿，直径大于1cm，或者比原来的皮丘增大超过0.3cm，或者局部有红晕，则视为阳性。
对可疑阳性的需要在另一侧用生理盐水作对照试验，使用青霉素前，无论是静脉肌注还是口服制剂都需要做皮试。而且皮试阴性，使用青霉素以后停药超过72小时需要重新做皮试。青霉素过敏导致的过敏反应，包括速发型过敏反应和迟发型超敏反应两类。速发型过敏反应一般大多在一小时内发生，而迟发型的一般发生在一小时以后。
青霉素过敏反应严重的，来势凶 猛、病情凶险、如果抢救不及时有可能导致死亡。因此，做青霉素皮试前一定要提前配备好抢救设备和药品，以防一旦发生过敏反应，能及时抢救。