骨髓穿刺术是通过穿刺骨髓腔抽取骨髓液的一种常用医疗操作技术，手术步骤主要包括穿刺部位选择、消毒、麻醉、调节穿刺针长度、进针、抽髓、涂片、骨髓培养、拔针。
一、穿刺部位选择：
髂前上棘是最常用的穿刺点，其他还有髂后上棘、胸骨柄、腰椎棘突等。
1.髂棘穿刺点：髂前和髂后上棘是常采用的穿刺点，患者取仰卧位，此部位骨面较平，易于固定。穿刺部位取髂前上棘后1～2cm处。髂后上棘穿刺点位于骶椎两侧，第5腰椎与第1骶骨旁开3～5cm处，臀部上方骨性突出部位，患者常取侧卧位，此部位穿刺的优点是骨髓含量较丰富。
2.胸骨穿刺点：患者取仰卧位，肩下置一枕头，使胸骨略微凸起，取胸骨柄与胸骨体的中点（相当于第1或第2肋间隙水平处）为穿刺点。因胸骨骨质较薄，其后有心脏和大血管，因而临床很少选用。
3.脊椎棘突穿刺点：临床极少选用，胸椎穿刺患者常取坐位，反坐于靠背椅上，双臂按置于椅背上，头伏于前臂上，腰部尽量后突，使棘突明显暴露，常采用第11、第12胸椎的棘突进行穿刺，骨质较坚硬须用较大力气。
4.胫骨穿刺点：仅适用于2岁以下的儿童，选胫骨上1/3处前方偏内侧中央处为穿刺点。
二、消毒：
用甲紫棉签标记穿刺点，待干燥后，先后用2%碘酊或碘伏进行穿刺部位皮肤消毒。以穿刺点为中点，消毒范围约10cm。
三、麻醉：
术者戴口罩及无菌手套，铺无菌洞巾于穿刺部位，局部用麻醉剂行浸润麻醉，经皮内、皮下，直达骨膜。拔出针头后，用手按摩注射处至麻醉药物扩散为止。
四、调节穿刺针长度：
检查骨髓穿刺针与20ml注射器是否完好配合，有无漏气，根据穿刺部位固定骨髓穿刺针的深度，使其能恰好达到骨髓腔内合适的部位。如髂前上棘穿刺，则将针尖长度用固定器调节固定在1.5cm处；髂后上棘穿刺时，将针尖长度固定在2～2.5cm处。胸骨穿刺时，将骨髓穿刺针的针尖长度固定在1cm（小儿为0.2～0.6cm）。脊柱棘突穿刺时，针尖长度固定在1.5cm处。临床常需按患者局部软组织的厚度而调节进针的深浅。
五、进针：
左手拇指和示指固定穿刺部位皮肤，右手持骨髓穿刺针垂直于髂前上棘或髂后上棘骨面进针。如胸骨穿刺时针尖斜面向下，针斜向腹部与骨面成30°～40°角进针。如行脊椎棘突穿刺则于棘突顶点或稍偏点进针。针尖刺入皮肤达骨面，然后垂直用力左右旋转钻入骨质，当突然感觉阻力降低，穿刺针已能固定于骨内时表示骨髓穿刺针已进入骨髓腔。
六、抽髓：
拔出骨髓穿刺针的针芯，针芯尖部抹在手套上，如针尖已入骨髓腔中，则此时手套上可见到闪光的油珠和少量血迹，此时将穿刺针连接不漏气的20ml注射器，适当用力抽吸骨髓液0.1～0.2ml，即见到红色骨髓液刚进入注射器口时，即停止抽吸。在进行骨髓抽吸时，患者会感觉穿刺局部轻微酸胀感。
七、涂片：
拔出注射器，将骨髓液注于清洁载玻片上，由助手迅速用清洁推片制作5～6张骨髓涂片。一张合格涂片应厚薄适中，并有“舌状尾巴”。经瑞氏染色后做细胞形态检查或用于细胞化学染色检查。
八、骨髓培养：
如需做骨髓培养者，则再接上注射器，抽取2ml骨髓液，在无菌条件下急速注入培养瓶中做细菌培养；其他检查，则再需抽取2～10ml注入肝素抗凝管。
九、拔针：
抽吸骨髓液完毕后，将针芯重新装入穿刺针内，左手持无菌纱布置于针眼附近，右手持穿刺针，左右旋转向外拔出穿刺针，局部用2%碘酊消毒后，用无菌纱布盖住穿刺点，按压1～2min后用胶布固定。