内分泌检查通常为激素检查，最佳时间因检查的具体内容而定。
内分泌检查因激素不同，检查时间有所不同。性激素通常在月经周期第2-3天检查；皮质醇检查，住院患者通常在早晨8:00、下午4:00、夜里0:00皮质醇分泌高峰时采血，在门诊通常早晨8:00检查；泌乳素检查的最佳时间为上午10:00；生长激素测定通常在夜间11:00-1:00采血；胰岛素测定在早上7:00-8:00空腹抽血，然后餐后半小时、1小时、2小时和3小时抽血检测；甲状腺激素检查在1天中任何时间均可进行等。
内分泌检查通常要求患者休息10分钟后采血，以免活动或情绪激动时采血不能反映真实的基础水平。