胰岛素注射液有两种使用方法，第一种是通过皮下注射降低血糖，第二种方法是和盐水配比，从静脉静滴控制血糖。部分胰岛素，包括长效、速效的胰岛素，如门冬胰岛素、地特胰岛素、甘精胰岛素，通常只能通过皮下注射的方法控制血糖。普通的胰岛素注射液是短效胰岛素，既可以通过皮下注射，也可以通过静脉使用。
皮下注射是在脂肪含量较多区域进行，比如腹部、大腿或者上臂等，进行酒精消毒后，用两指将皮下脂肪捏起，使用胰岛素笔将胰岛素注射液注射到皮下，通过皮下脂肪的吸收达到控制血糖。若出现糖尿病急性的并发症或者血糖较高，进行稀释以后，可通过静脉使用降低血糖。