膏肓穴的准确位置位于人体背部，具体在脊柱区，第4胸椎棘突下，后正中线旁开3寸处。这个位置隶属于足太阳膀胱经，是中医经络系统中的一个重要穴位。
关于这个穴位，可以先找到人体的胸椎棘突。胸椎棘突是胸椎后方的骨性突起，从上到下依次排列。第4胸椎棘突位于脊柱的中上部，大致与肩胛骨下角平齐。然后从第4胸椎棘突向两侧水平移动，距离约为患者本人的四指并拢宽度（中医所谓的“同身寸”），即为膏肓穴的左右两侧位置。
膏肓穴属于足太阳膀胱经，该经是中医十二经脉之一，循行于人体背部及下肢外侧，具有调节水液代谢、维护体表防御功能等作用。膏肓穴具有滋阴润肺、补虚益损、通络止痛的功效。在中医临床中，常用于治疗支气管炎、支气管哮喘、乳腺炎等呼吸系统疾病，以及各种慢性虚损性疾病。此外，膏肓穴还是保健灸的常用穴，通过艾灸膏肓穴可以增强体质、预防疾病。
取穴时，患者需呈低头位，以便更好地暴露背部穴位。医者可通过触摸脊柱棘突来定位第4胸椎棘突，然后向两侧旁开3寸找到膏肓穴。需要注意的是，由于每个人的体型和骨骼结构存在差异，因此在取穴时应根据患者的具体情况进行微调 。
在针灸治疗中，膏肓穴通常采用斜刺法，进针深度为0.5-0.8寸。艾灸时，则可使用艾条或艾炷对膏肓穴进行温和灸或隔物灸，以达到温通经络、散寒除湿、补益气血的目的。