妥布霉素滴眼液，打开后多久不能用，要根据妥布霉素滴眼液的瓶装剂型进行区分。一般常用的5mL或8mL小瓶装的妥布霉素滴眼液，在室温保存情况下，1个月内可以使用，超过1个月应丢弃。因为即便小瓶包装的妥布霉素滴眼液内含有防腐剂，但仍有可能出现药剂被污染，或滴眼液性质发生变性的可能性。
妥布霉素滴眼液还有一种剂型是单一包装0.04mL的小剂型，这种剂型不含防腐剂，因此保存时间更短。一旦开封后，一般要求当次当天使用，如果超过24小时，发生药物被感染，或变性的风险，会大大增高。所以即使当天未使用完，也建议丢弃。值得注意的是因为长期使用妥布霉素滴眼液，可能会导致耐药菌过度生长，甚至使眼部出现真菌感染，所以使用本药期间，要注意遵医嘱应用，降低不良反应的发生概率。