试管婴儿打夜针的时间，主要依据卵泡大小、数量和激素水平决定。一般当两侧卵巢内大于18mm的卵泡有2-3个时，就可以打夜针。一般高龄女性的卵泡数目较少，打夜针的时间会相对靠前，以防取卵当日卵泡提前排卵破裂，导致取卵失败。
夜针就是注射人绒毛膜促性腺激素，当女性在做试管婴儿时，需要在合适的时间注射人绒毛膜促性腺激素，以促进卵子的快速成熟。打夜针后，一般情况下是在34-36小时后进行排卵，为不影响白天取卵，所以一般会在夜里注射药物，因此得名打夜针。当雌二醇小于40pg/ml，两侧卵巢有至少两个卵泡在15-20mm时，就可以打夜针。
夜针的注射时间一定要按照医生嘱咐的时间执行，并且要足量注射药物，不能漏打、少打，或者不按时间注射。注射夜针之后要避免同房、避免剧烈的运动，并按照要求在指定的时间内进行取卵。