75%酒精和95%的酒精均具有一定的消毒杀菌效果，因浓度不同，所以作用途径并不相同，生活中及临床上，杀菌、消毒常使用75%的酒精。
因为75%的酒精吸水性较好，能使菌体蛋白质变性、脱水、沉淀，且过程较缓慢地进行，因而渗透性特别强，能不断地渗入菌体内部作用于菌体内蛋白质，最后达到杀细菌的目的。95%酒精浓度较高，具有较强的吸水性，能迅速使细菌的细胞膜脱水凝固，从而形成一层阻止酒精向菌体内渗入的保护膜，使菌体并不直接与酒精相接触，因而难以达到将细菌彻底杀灭的目的，可影响杀菌效果。因此，一般认为75%的酒精消毒效果更好。
75%的酒精常用于皮肤消毒、脱碘、医疗器械等消毒，但一般不用做创面消毒，因为创口处神经较敏感，而酒精易刺激创口引发疼痛。95%的酒精则一般不用于杀菌、消毒，而常用于酒精灯的燃料或用于配比75%的酒精。