排卵试纸测定排卵的结果和检测的时间无关，无论是早上还是晚上，不会因尿液浓缩和稀释增加或减低，排卵试纸是通过了解体内黄体生成素的高低，来间接反映是否排卵，一般习惯在早上测试，但晚上也可以测定。
排卵试纸测排卵和检测妊娠有不同之处，妊娠早期HCG的含量比较低，为了增加其阳性率，早上用浓缩尿可以增加阳性率，而排卵则不同，排卵前后黄体生成素逐渐升高，只有在排卵期黄体生成素达到高峰，才有可能排卵，高峰值在何时测定都已经存在，所以排卵试纸测定，无论是早上还是晚上都可以提供准确的阳性结果。
排卵试纸的使用只要固定时间进行检测就可以，无需刻意的早晨或者是晚上检查。同时排卵试纸的测定不能仅测一次，因为有时仅测一次会有误差，可以连续检测数日，可以发现排卵试纸阴性到弱阳性到强阳性的过程，从而准确推断什么时候是排卵日期。如果仅测一次不能判断出现强阳性的时间和消失的时间，推算出的排卵日会不准确，所以要规律多次测试，发现排卵可以安排同房。