患者在进行化疗时都会感受到一定的痛苦，但并没有化疗第几次最痛苦这一说法。化疗药物分为烷化剂、抗代谢药、抗癌抗生素、植物类、激素类等，不同类型的化疗药物对人体的毒副作用程度不同，每个人对于化疗药物的耐受程度和表现存在差异，无法判断个人化疗第几次最痛苦，可能第1次，或第4-5次、5-6次。
比如对于病情严重的恶性肿瘤患者，可能在第1次化疗时，由于对化疗药物的毒副作用耐受性较差，就会出现明显的不适现象，感觉痛苦。而对于身体状况较好的患者，可能前两次化疗反应会比较轻，到了化疗第4-5次时，不良反应开始严重，在应用同样剂量的药物时，才感觉十分痛苦。也有化疗了5-6次之后才出现严重的痛苦反应，或随着化疗次数的增加，反应越来越重，需要积极配合医生应用止吐、止疼以及保护胃的药物来减轻痛苦，才可继续进行治疗。
临床使用的化疗药物对人体均有不同程度的毒副作用，在杀伤肿瘤细胞的同时，又杀伤正常组织的细胞，尤其是杀伤人体中生长发育旺盛的血液、淋巴组织细胞等。人体正常的胃肠黏膜上皮细胞、头发毛囊细胞、造血干细胞等，在化疗药物的作用下，患者就会出现相应的食欲不振，甚至恶心 、呕吐、掉头发、白细胞血小板降低等反应。化疗可分为术前化疗、术后辅助化疗、姑息性化疗等，术前化疗一般2-4次，术后辅助化疗在6-8次，姑息性化疗次数不定，根据病人的身体状况及肿瘤发展情况而定。