冻胚移植第4天无法用尿HCG试纸检测到水印，部分患者可能在移植后检测到水印，但会出现逐渐变淡情况，此时水印通常与冻胚前注射的促排卵药物有关。通常为确保患者能够排出卵泡，可能会使用1万单位左右的HCG进行注射。
HCG半衰期较长，可以作用8-10天，因此HCG与受体结合时间较长。如果移植第3天胚胎，注射HCG后到移植后第4天，此时HCG还未完全从体内代谢，会出现较浅水印或早期出现水印。
若在检测水印时发现水印会逐渐变浅，则说明查到的水印为注射促排卵针所致。因此，在移植第4天不要进行检查，因为此时怀孕产生的HCG还未显现，而胚胎也处于刚着床状态。如果为囊胚，此时刚产生一定水平的HCG，但无法在尿液中有所反映。