正常人皮质醇呈脉冲式分泌，昼夜节律明显，午夜23-24点为低谷，晨起八点左右为峰值。测定血的皮质醇节律，有助于诊断皮质醇增多症，通常采用三点法，可在早上8点、下午16点，午夜0点抽血测定皮质醇。
如果是皮质醇增多症的患者，晨起皮质醇正常或轻度增高，晚上入睡以后进一步升高与早晨水平相当。血皮质醇昼夜的节律消失，是确诊皮质醇增多症的简易方法，但是有可能受到多种因素的影响，造成假阳性。住院以后，应该在48h以后再进行测定，让患者适应环境，避免应激影响，同时采血以前不影响入睡，午夜如果没有睡着，采血的结果不可靠，必须在醒了以后10分钟之内完成采血。肥胖、心力衰竭、感染、抑郁症都可能造成皮质醇增高，甚至影响皮质醇的节律。
如果是皮质醇增多症的患者，晨起皮质醇正常或轻度增高，晚上入睡以后进一步升高与早晨水平相当。血皮质醇昼夜的节律消失，是确诊皮质醇增多症的简易方法，但是有可能受到多种因素的影响，造成假阳性。住院以后，应该在48h以后再进行测定，让患者适应环境，避免应激影响，同时采血以前不影响入睡，午夜如果没有睡着，采血的结果不可靠，必须在醒了以后10分钟之内完成采血。肥胖、心力衰竭、感染、抑郁症都可能造成皮质醇增高，甚至影响皮质醇的节律。