1、血清支原体IgM抗体：通过检查可见支原体IgM抗体于感染后一周开始上升，4~5周达高峰，可用于早期诊断。

2、支原体培养：采集患者痰、鼻咽洗液及气管分泌物培养，10日左右可得阳性结果，培养阳性须做红细胞溶解试验或特异性抗体抑制生长试验确定。培养分离出支原体对诊断及鉴别诊断有决定性意义。

3、支原体特异性核酸：

（1）核酸杂交：采用放射性或同位素探针，检测特异性核酸具有快速、特异及灵敏的特点。

（2）多聚酶链反应：一种支原体感染简便、快速、敏感及特异的诊断方法。需一定设备及技术条件。另有一种基于核酸序列的扩增技术，用于检测支原体的RNA，敏感性高，操作简便。

4、X线检查：该检查可以进一步观察肺部病变及泌尿生殖系统的状况，有助于支原体感染的诊断。

5、B超或CT检查：如其他检查无较大发现，可以进一步进行B超或CT检查，能多方面发现患者可能存在的异常表现，为诊断及治疗提供依据。

6、尿常规：可以辅助明确患者有无其他疾病，如合并尿道炎时，尿镜检可见白细胞及红细胞。

7、内镜检查：可直接观察泌尿生殖系统炎症病变，亦可自子宫内膜及输卵管取标本，支原体分离而确诊。