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胰岛素功能测定常与口服糖耐量试验同时进行，并在禁食一夜后次日清晨空腹状态下采血。许多生理和药物因素影响血糖值和胰岛素的分泌，如做试验时的情绪，进食时间的长短等。

有些药物如氨茶碱类组织剂，糖皮质激素，口服避孕药等应停服3天后再进行试验，试验测定空腹，口服75g葡萄糖后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟的血清胰岛素。

正常人的胰岛素分泌常与血糖值呈平行状态，在服糖后30-60分钟达到峰值，其浓度为空腹的5-7倍，达到峰值后的胰岛素测定值较峰值应有明显的下降，180分钟的测定值应只比空腹值略高，这组实验主要用于测定胰岛素细胞的分泌功能，胰岛素依赖型糖尿病空腹值低，服糖后仍无反应或反应低下，呈不反应型。

非胰岛素依赖性糖尿病空腹值正常或增高，服糖后胰岛素水平增加甚至过强，峰值到来的晚，常在120分钟甚至180分钟出现。但该型糖尿病在晚期也可呈不反应性。